第二节 灭菌方法与无菌操作
灭菌法：指杀死或除去所有微生物及芽孢的方法，一般可分为物理灭菌法和化学灭菌法。
一、物理灭菌法
物理灭菌法系指采用加热辐射等物理手段达到灭菌目的的方法。
（一）加热灭菌法
加热可破坏微生物中的酶、蛋白质核酸，导致微生物死亡。
1. 干热灭菌法：常用火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。
（1）火焰灭菌法：系指用火焰直接烧灼以达到灭菌的方法。
（2）干热空气灭菌法：系指用烘箱等设备用高温干热空气灭菌的方法。
（3）高速热风灭菌法：在侧面吹入190℃的高速热风灭菌的方法。
2. 湿热灭菌法：利用饱和水蒸汽或沸水等杀灭微生物的方法。
（1）热压灭菌法：系在热压灭菌器内，利用高压饱和水蒸汽杀灭微生物的方法。
热压灭菌器在使用时应注意以下问题：
①检查仪表，使用前应该检查压力表、温度表、安全阀等部件。②排尽空气，饱和蒸汽热压灭菌效力强于湿饱和蒸汽和过热蒸汽。为保证饱和蒸汽的获得。首先开启放汽活门，将灭菌器内空气排尽，使压力与温度相符。③准确计时，一般先预热15~20mm，再升压和升温，达到预定压力和温度后，开始计时。④安全开启，灭菌完毕后，停止加热，待压力表指针降至“0”，打开上放气阀，排尽器内蒸汽，待温度降至40℃以下，再缓缓开启门盖，不可快速放气，骤然减压会导致容器爆裂和药液外溢。
（2）流通蒸汽灭菌法和煮沸灭菌法，系指在常压下用100℃水蒸汽或用水煮沸以杀灭微生物的方法，灭菌时间一般为45~60min。
（3）低温间歇灭菌法。
（二）滤过除菌法
系指使药液通过除菌滤器中的适宜滤材、机械滤除（阻挡）活的或死的细菌，而得不到含细菌药液的方法，一般滤材径在0.2μm以下，才可有效地阻挡微生物及芽孢的通过。
（三）紫外线灭菌法
紫外灯产生紫外线，其中波长254nm的紫外线杀菌力量强，紫外线可使微生物核酸蛋白质变性死亡，同时空气受紫线辐射后产生微量臭氧也有灭菌作用。
（四）微波灭菌法
（五）辐射灭菌法：系指应γ射线、β射线杀灭细菌的方法。
其灭菌机理是γ射线直接作用于微生物蛋白质、核酸酶等，促使化学键断杀死微生物。又可作用于微生物蛋白质、核酸酶等，促使化学键断杀死微生物。又可作用于微生物体内的水分子，引起水的电离和激发，生成自由基，再作用于微生物活性分子，使微生物死亡。
三、化学灭菌法
化学灭菌法：系指用化学药品来杀灭微生物的方法。
（一）消毒剂消毒法
消毒是指杀死病原微生物的方法，常用于物体表面灭菌消毒法。但化学消毒剂仅能杀死微生物的繁殖体，而不能杀死芽孢，能控制一定范围的无菌状态。常用化学消毒剂有0.1~0.2%苯扎溴铵溶液、3~5%的酚或煤酚皂溶液、75%乙醇等。常用于物体表面灭菌。
（二）化学气体灭菌法
系指用化学药品的气体或产生的蒸汽进行杀灭微生物的方法。常用于空气环境灭菌法。
1、环氧乙烷灭菌法
2、甲醛等蒸汽熏蒸法，采用甲醛、丙二醇或过氧醋酸等化学药品，通过加热产生蒸汽进行空气环境灭菌。
四、无菌操作法
系指药剂生产整个过程均控制在无菌条件下进行的操作方法。
[本文共有 12 页，当前是第 3 页] <<上一页 下一页>>
+86-755-25831330
